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棕榈酸钠/棕榈酸水溶液高脂细胞添加剂

产品简介

  1. 本产品经0.22μm滤器过滤除菌,可直接加入到含血清(一般为10%)细胞培养基中诱导高脂损伤。

  2. 本产品也可配合高浓度葡萄糖模拟2型糖尿病高糖高脂损伤。

  3. 本产品所用溶剂不含NaOH或有机溶剂,对细胞无毒性。

  4. 本产品适用于所有类型的细胞。

  5. 本产品可用于诱发细胞脂毒性、诱导内质网应激、氧化应激、线粒体损伤、细胞凋亡等,见效果图1和图2及参考文献。

 

图1. 高脂细胞添加剂剂量依赖性诱导H9C2心肌细胞凋亡。分别给予H9C2心肌细胞倍比稀释(1:60,1:30,1:20,1:15)的6mmol/L棕榈酸钠(High lipid)、溶剂对照(Control)或空白对照(Blank),24小时后,进行Annexin V-FITC(横坐标)、碘化丙啶(Propidium iodide, PI,纵坐标)双染,采用流式细胞仪检测细胞凋亡(Annexin V-FITC阳性、PI阴性,右下象限黑色框内),图A~图G是流式细胞检测结果,图H是细胞凋亡率的统计结果。

图2. 高脂细胞添加剂剂量依赖性诱导内皮细胞凋亡。分别给予小鼠主动脉内皮细胞倍比稀释(1:60,1:30,1:20,1:15)的6mmol/L棕榈酸钠(High lipid)、溶剂对照(Control)或空白对照(Blank),48小时后,采用Western blotting法检测Cleaved caspase-3的蛋白水平。图A是Western blotting检测结果,β-actin是参照蛋白,图B是统计结果。

使用说明

  1. 针对不同细胞种类及实验目的,本产品所用浓度不同,一般与培养基总体积按1:60-1:12稀释,终浓度为100-500umol/L。

  2. 对于首次使用本产品,建议采用浓度梯度处理细胞,摸索针对特定细胞、达到特定效果的适宜浓度。处理时间上可通过镜下观察细胞状态初步判断,一般20-48小时为宜。

  3. 待细胞生长至80-100%汇合度时,换成新鲜含血清(一般10%)培养基,按适当浓度滴加高脂细胞添加剂,对照组加入等量溶剂对照,轻柔混匀后将细胞放入细胞孵箱中继续培养。

  4. 如需检测细胞活力(CCK-8MTT),高脂试剂和溶剂对照处理后,加入CCK-8MTT前,需用PBS清洗2次,以去除溶剂对照和高脂试剂对吸光度的影响。

西安鲲创科技发展有限公司

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